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脂質(zhì)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染為什么是首先選的轉(zhuǎn)染方法?
發(fā)布時(shí)間: 2021-10-09 點(diǎn)擊次數(shù): 1496次在細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中,我們常常要根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,轉(zhuǎn)染細(xì)胞的不同,選擇我們將要使用的實(shí)驗(yàn)方法。
脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染是我們的首先選擇,他具有易操作,重復(fù)性好,低毒性和適用于懸浮培養(yǎng)體系細(xì)胞的特點(diǎn),在很多轉(zhuǎn)染方法效率低的情況下,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法效果很好。
其中,脂質(zhì)介導(dǎo)轉(zhuǎn)染試劑的典型,非脂質(zhì)體型FuGENE6和陽離子脂質(zhì)體Lipofectamine2000能夠在有血清的干擾下成功轉(zhuǎn)染細(xì)胞,減少轉(zhuǎn)染的操作步驟。
脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染的原理主要是通過靜電作用,將帶有負(fù)電荷的DNA與陽離子脂質(zhì)結(jié)合,形成脂質(zhì)-DNA復(fù)合體。這樣的復(fù)合體較為穩(wěn)定,能夠延緩核酸酶的降解作用。
脂質(zhì)-DNA復(fù)合體通過細(xì)胞膜的融合,或細(xì)胞的內(nèi)吞作用,進(jìn)入到細(xì)胞中。
脂質(zhì)介導(dǎo)法轉(zhuǎn)染除了基因片段,還可以運(yùn)載大質(zhì)粒。除了瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,也可以用于建立穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞系。
因此,在其他轉(zhuǎn)染方法效率低的情況下,可以使用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法。針對(duì)原代細(xì)胞或分化細(xì)胞,或者轉(zhuǎn)染大質(zhì)粒等高分子質(zhì)量DNA時(shí),也推薦使用脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染。
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