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    電穿孔法轉染如此“萬能”,為什么還要用其他方法?

    發布時間: 2021-10-09  點擊次數: 1870次

    同學們在進行轉染時,肯定被各種各樣的轉染試劑挑花了眼吧。商業化的轉染試劑通常針對多重細胞類型、不同的核酸和各種特定的用途,也就是說,你要從種類繁多的試劑中挑選適合你的。


    這時候,電穿孔法轉染就進入了我們的視野。


    電穿孔法轉染原理是通過脈沖電場,使得細胞膜上產生小孔,通透性被暫時的提高。周圍的小分子穿過小孔,擴散到細胞內。理論上說,電穿孔法轉染是可以對任何細胞進行轉染,可以轉染DNA、RNA、蛋白、糖類等,也不需要特殊的試劑。


    但為什么還是有很多實驗者選擇了脂質體介導法等方案呢?原因如下

    1、電穿孔法雖然不需要特殊試劑,但需要購買昂貴的電轉儀。


    2、電穿孔法轉染會殺死細胞,因此需要較多的細胞和外源分子。


    3、電穿孔法對實驗者的操作水平要求較高。過低的電場強度、過長的電脈沖時間,會裂解細胞;電壓過低,過短的電脈沖時間則會降低轉染效率。


    因此,電穿孔法不是真正的“萬能",實驗上也需要多學習、優化。


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