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AO染色法(丫啶橙染色法)檢測細胞凋亡
發布時間: 2021-11-01 點擊次數: 3020次材料與儀器【試劑】pH4.8~6.0 Tritionx-100的PBS緩沖液, AO染料:將AO染料溶于含1%TritionX-100的PBS中,終濃度為6μg/ml,含Rnase100μg/ml,避光保存。 【儀器】熒光顯微鏡
實驗步驟制備活細胞懸液106 /ml; 取95μl細胞懸液,加5μl的AO染液混合、避光作用10min; 加入5ml PBS,1500r/min離心5min,棄上清,重復洗滌2次; 重懸細胞,吸一滴滴于玻片上并用蓋玻片封片;
要點在熒光顯微鏡下,選用515nm激發光鏡檢:AO染色細胞DNA呈黃色或黃綠色。當細胞凋亡時,染色呈致密濃染的黃綠色熒光或見黃綠色碎片。
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