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Calcein釋放實驗檢測細胞毒性T淋巴細胞活性實驗方法
發布時間: 2021-11-12 點擊次數: 1341次實驗步驟1. 靶細胞的標記用5μmol/L Calcein AM 37℃ 水浴30min進行標記。2. 效-靶細胞作用殺傷實驗在圓底96孔培養板中進行。按E/T比例:50/1、25/1、12.5/1、6.25/1、3.13/1、1.56/1加入梯度稀釋的效應細胞與標記好的靶細胞各l00μl/孔,每個比例3復孔。同時設自發釋放組3復孔,*釋放組3復孔。效-靶細胞作用96孔培養板在37℃ 5% CO2培養箱孵育4h后,3000r/min離心5min,將上清移入新的孔中。3. 熒光檢測
用熒光測量儀檢測上清的熒光值(FI),激發光為485nm,發射光為538nm。4. 結果計算殺傷率(%)=■×100%- 下一篇:分離培養細胞的操作步驟
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