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細胞培養(yǎng)常遇問題集錦(六)
發(fā)布時間: 2021-12-01 點擊次數(shù): 1184次26、
▲問:有時候細胞和細胞之間就會出現(xiàn)這種小黑點,高倍鏡下看少數(shù)在原地打轉(zhuǎn),但是培養(yǎng)液不渾濁。那其中不會動的是細菌嗎?
答:原地打轉(zhuǎn)的可能為黑膠蟲,會動的是細菌,細菌有鞭毛。黑膠蟲是一種現(xiàn)象,身份可能是細菌,有鞭毛會游動。
27、
問:想問一下,已經(jīng)使用三抗以及抗支原體的藥物培養(yǎng)細胞一周,但還是有少量黑膠蟲,但細胞生長狀態(tài)還好,這樣的話接下來還需要處理嘛?好像有一種有少量黑膠蟲但不影響細胞狀態(tài)可以不做處理的說法?
答:一周,黑膠蟲數(shù)量減少,已經(jīng)見效了,但還是要繼續(xù)處理,因為黑膠蟲和細胞有此消彼長的特點,細胞復(fù)蘇或剛傳代時,因為此時細胞狀態(tài)差,所以特別容易爆發(fā)黑膠蟲,黑膠蟲數(shù)量增多,當(dāng)細胞復(fù)蘇率增強時,黑膠蟲數(shù)量會減少。
28、
問:話說養(yǎng)細胞的時候,一直加雙抗,會對哪些實驗有影響呢?之前聽說做干擾的時候,要撤雙抗。
答:一般做功能學(xué)實驗,藥理學(xué),毒理學(xué),信號通路都要撤掉雙抗。
29、
問:Cho傳代接種密度0.4 e5,4天才長到11e5,是怎么回事?DT從16.5變成20了。一直都用的一樣的培養(yǎng)基,是不是凍溶會影響?是cho細胞,搖瓶培養(yǎng)。
答:檢查一下營養(yǎng)體系是不是不適合,如不是,那就考慮是胰酶消化這一步是不是有問題。你這邊是把cho貼壁馴化成懸浮了。
30、
問:請問怎么培養(yǎng)破骨細胞?怎么提取到培養(yǎng)的protocol?遇到一個情況,怎么消化也消化不下來,想從源頭找一找,是什么原因?
答:破骨細胞的培養(yǎng)方法主要有:骨髓機械分離法,骨髓細胞誘導(dǎo)法,脾干細胞誘導(dǎo)法,血液單核細胞誘導(dǎo)法,小鼠RAW264.7細胞系誘導(dǎo)法及骨巨細胞瘤分離法。
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