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細胞瞬時轉染
發布時間: 2022-03-14 點擊次數: 953次摘要:
通過脂質體介導轉染法及電穿孔等基因轉染技術,將靶基因導入細胞,一般在轉染后48小時左右,靶基因即可在細胞內表達。根據不同的實驗目的,48小時后即可進行靶基因表達的檢測等實驗。
原理:
通過 脂質 體介導轉染法及電穿孔等基因轉染技術,將靶基因導入細胞,一般在轉染后48小時左右,靶基因即可在細胞內表達。根據不同的實驗目的,48小時后即可進行靶 基因表達 的檢測等實驗。
應用:
觀察目的基因及其表達蛋白在某種細胞中的功能(短時間即可進行觀察,但效應會很快丟失)。
一般流程:
1)細胞接種:轉染實驗前天接種細胞,各種細胞的平板密度依據各種細胞的生長率和細胞形狀而定。進行轉染當天細胞密度應達到60%~80%覆蓋。
2)細胞轉染(脂質體、電穿孔、FuGENE6等)
3)48小時以后鑒定目的基因的表達情況。
前期準備:
構建好的外源基因載體,或目的基因基本信息。
待轉染的細胞系(1×106個細胞,可傳代,倍增時間小于48小時)以及 細胞培養 條件的說明。
若需要檢測靶基因的表達,請提供相應 抗體 。
結果呈現:
構建好的瞬時轉染細胞及相關的外源基因表達分析。
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