產(chǎn)品展示PRODUCTS
RAW264.7細(xì)胞質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑
更新時間:2024-06-26
訪問量:1220
廠商性質(zhì):代理商
生產(chǎn)地址:美國
一、RAW264.7細(xì)胞質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品詳情:
Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學(xué)舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動物細(xì)胞、活體動物轉(zhuǎn)染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑,此技術(shù)成為新的全球蛋白功能、免疫細(xì)胞及干細(xì)胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。Zeta Life轉(zhuǎn)染試劑可轉(zhuǎn)染極度難轉(zhuǎn)染的免疫細(xì)胞、懸浮細(xì)胞,如:T細(xì)胞、NK細(xì)胞、人淋巴細(xì)胞、THP-1等;可高效率轉(zhuǎn)染siRNA到任何哺乳動物細(xì)胞;用于將 DNA 和 siRNA 轉(zhuǎn)染到真核細(xì)胞系和各種原代細(xì)胞中;轉(zhuǎn)染細(xì)胞后可10小時內(nèi)快速代謝的第三代新轉(zhuǎn)染試劑。
二、產(chǎn)品說明:
1、產(chǎn)品名稱
Advanced DNA RNA Transfection Reagent
2、包裝規(guī)格
貨號:AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150
規(guī)格:0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml
3、儲存條件
常溫運輸,4℃保存,可保存兩年,拒絕反復(fù)凍融。
三、RAW264.7細(xì)胞質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染質(zhì)粒大小6000bp效果圖和轉(zhuǎn)染操作方法
操作方法
提前 1 天接種細(xì)胞:細(xì)胞匯合度在 60-80%左右,再進(jìn)行轉(zhuǎn)染。
核酸復(fù)合物制備:將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照 1:1 關(guān)系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混勻,室溫靜 止 10-15 分鐘。
在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入核酸復(fù)合物:根據(jù)參考用量在細(xì)胞中加入核酸復(fù)合物,并輕輕混勻;細(xì)胞培養(yǎng)基 里面可以含有血清。
細(xì)胞換液:轉(zhuǎn)染 24 小時后對細(xì)胞進(jìn)行正常換液,懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程中不用換液。
分析結(jié)果:質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染 48-72 小時后熒光檢測轉(zhuǎn)染效率,48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達(dá)。若 進(jìn)行穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株的篩選,則在轉(zhuǎn)染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進(jìn)行篩選。siRNA 轉(zhuǎn)染后 9 小時熒光檢測轉(zhuǎn)染效率,48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達(dá)。
四、注意事項:
1、質(zhì)粒 DNA 必須溶解于無菌雙蒸水或超純水,但不能溶解于提取試劑盒提供的 Buffer。溶解于 Buffer 的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率會下降 80%左右,甚至?xí)D(zhuǎn)染失敗。
2、質(zhì)粒必須去除內(nèi)毒素,內(nèi)毒素對細(xì)胞將產(chǎn)生很大的細(xì)胞毒性,會導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率下降 70%-80%左 右,甚至導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失敗(推薦使用 Qiagen、TIANGEN、Omega 去內(nèi)毒素質(zhì)粒提取試劑盒)。
3、復(fù)合物的制備過程中是絕不能用其他任何試劑對核酸或轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行稀釋,只需將核酸和轉(zhuǎn)染 試劑兩者按 1:1 比例直接混合,如果進(jìn)行了稀釋會導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失。
4、轉(zhuǎn)染試劑與核酸混勻后用移液器吹打 10-15 次,室溫孵育 10-15 分鐘后即可加入細(xì)胞培養(yǎng)板。
5、轉(zhuǎn)染 24 小時后進(jìn)行正常換液,不能像 Lipo2000 一樣轉(zhuǎn)染 4-6 小時后換液。
6、原代細(xì)胞、免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染時,細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基里面不能含有雙抗培養(yǎng)基。
深圳市安培生物科技有限公司是美國 Zeta Life 公司的中國代理商。Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑大量現(xiàn)貨,均經(jīng)過反復(fù)充分驗證,轉(zhuǎn)染效果好且重復(fù)性佳,提供完整售后服務(wù)和技術(shù)支持。尊敬的客戶您如在訂購過程中遇到任何問題都可以與我司客戶經(jīng)理聯(lián)系尋求幫助。